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NEWS人卵巢癌细胞A2780的尊龙凯时培养法
来源:季黛琼 日期:2025-02-13尊龙凯时提供的人卵巢癌细胞A2780培养说明书旨在帮您更好地进行细胞培养与实验研究,本说明书包括细胞的培养条件、传代、冻存及复苏等多方面信息。
细胞名称:人卵巢癌细胞A2780
生长特性:贴壁生长
冻存条件:无血清冻存液
培养体系:1640培养基 + 10% FBS + 1% L-谷氨酰胺 + 1% P/S
传代建议:首次传代比例1:2,传代后每2天更换培养液。
备注:使用无菌离心管收集培养基以备用对比培养,若效果不佳,建议直接购买尊龙凯时的完全培养基。
接收到细胞后,应首先培养至良好状态,然后将其浸满完全培养液并封好瓶口,确保运输后的细胞稳定。使用75%酒精消毒细胞瓶,将其放入超净台进行无菌操作,之后将瓶放置于37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时,以帮助细胞适应新环境。借助显微镜观察细胞的生长情况,并拍摄不同倍数的照片(建议拍摄40x、100x、200x),以便于售后对比。
a. 细胞传代:
若未超过80%汇合度,收集培养液留5ml灌入37℃、5% CO2培养箱;超出80%密度时,进行传代:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁的PBS清洗细胞1-2次。
2. 向培养瓶中加入0.25%胰蛋白酶,观察细胞变圆后,迅速加入培养基停止消化。
3. 吸出细胞悬液并离心5分钟,重悬后以1:2的比例分瓶(两个T25瓶),补充新培养基。
b. 细胞冻存:
1. 当细胞覆盖80%培养瓶时,弃去培养液并用PBS清洗。
2. 添加胰蛋白酶,待细胞收缩后加入完全培养液终止消化,离心并重悬。
3. 加入无血清冻存液,仔细混匀后转入冻存管,最后放入-80℃冰箱。
c. 细胞复苏:
1. 从液氮中取出冻存管,迅速放入37℃水浴解冻。
2. 将细胞转移至含完全培养基的离心管,离心并重悬。
3. 移至T25瓶中,在37℃、5% CO2箱中培养,次日更换新培养基。
某些细胞或因运输而导致的状态变化是正常的,当细胞在运输过程中脱落时,需将培养液收集,离心后补充胰酶进行消化处理,再按比例进行传代培养以确保细胞生长状态良好。
尊龙凯时对细胞问题提供适当的售后处理:
1. 出现细胞问题时可重发的情况包括运输损坏、细胞污染等。需在收到后48小时内反馈真实的实验结果。
2. 不予重发的情况包括客户操作不当、培养体系不符合要求等。
全国客户服务热线
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